Como no meu trabalho havia pessoas que não sabia colocar senha de abertura no excel manualmente resolvi criar este artigo para facilitar a todos.
Se por acaso você neste artigo e gostaria de saber como fazer para colocar em vba, então veja o artigo Inserir senha no arquivo excel com vba
Coloco aqui um pequeno tutorial para excel 2007 e as versões posteriores
Senha de abertura no excel 2007
Realmente acho estranho o modo como os desenvolvedores do Excel 2007 disponibilizaram a opção de proteger a abertura do arquivo.
1 > Para inserir a proteção de abertura é necessário apertar o botão 
2 > Clicar em Salvar Como
3 > Irá abrir uma janela…Escolha o diretório,e em baixo existe um botão Ferramentas (do lado do botão salvar)clique nele
4 > Escolha a opção -> Opções Gerais
5 > Agora você poderá colocar a senha e confirmá-la
6 > Irá pedir mais uma vez a senha
7 > Agora clique e salvar e fim
Senha de abertura no excel 2010
Demonstração através do vídeo